Người Nhện 3 kể về Peter Parker (Tobey Maguire) đã tìm được bình yên trong cuộc sống bên cạnh người anh yêu. Nhưng cậu bạn cũ Harry Osborn khám phá ra bí mật về bộ giáp Green Goblin do người cha quá cố để lại. Cũng đúng lúc này, bỗng có một thứ vật chất biến bộ đồ của Spider-Man thành màu đen và khiến tính khí của Peter Parker đột ngột thay đổi, trở nên cao ngạo hơn bao giờ hết. Rồi thứ vật chất đen bí ẩn kia còn biến Eddie Brock (Topher Grace) trở thành Venom (Người Nhện Đen) – có những khả năng y hệt như Spider Man. Giờ đây Spider Man phải tìm cách thoát khỏi thứ vật chất gớm ghiếc kia và chuẩn bị cho một cuộc chiến lớn với ba kẻ thù đầy nguy hiểm kia… Tình yêu, tình bạn và những giằng xé nội tâm sẽ giúp được gì khi Người Nhện không còn khoác trên mình bộ đồ màu đỏ quen thuộc?